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卫生部关于印发突发人间禽流感应急预案及有关防治方案的通知[失效]

  2.1 血清学检测结果: (1)HI阳性 (2)HI阴性 □

  附件3
禽流感实验室检测技术方案(试行)

  本方案是为指导实验室检测禽流感而制定。
  一、禽流感病毒实验室安全
  禽流感病毒检测的实验室生物安全应按微生物生物安全分类要求在P3级实验室进行。
  二、标本的采集、运送
  1、采集标本的种类:疑似禽流感患者的咽、鼻拭子或含漱液、血液以及死亡病例的尸检组织。
  2、采集标本时间:用于分离病毒的标本应为发病2-3天,最好不超过7天。用于血清检测标本应采急性期和恢复期的双份血液。急性期尽早采集,最迟不超过发病后7天,恢复期血清应在发病后14后采集。
  3、标本的运送:参照中国CDC关于SARS标本运送要求。
  4、采集时的防护:疑似病例的标本应参照SARS要求。
  三、检测程序
  1、疑似病例咽拭子或含漱液、鼻拭子和尸检组织
  (1)病毒分离、鉴定
  用组织培养和鸡胚分离法。具体方法同常规人流感检测,详见《全国流感监测方案(试行)》(中疾控发[2003]445号)附件。不同的是鸡胚接种一定要用SPF鸡胚。
  鸡胚或细胞培养物进一步用HA和HI试验鉴定,方法见(中疾控发[2003]445号)附件。试验试剂用WHO提供的试剂盒。
  经HI试验H5抗体阳性者报送国家流感中心。HA阳性HI试验H5阴性,也送国家流感中心。
  (2)RT-PCR或实时RT-PCR试验
  该方法可作为早期实验室诊断的参考依据。可和病毒分离培养同时进行帮助早期判定。
  2、疑似病例血清的检测
  (1)感染早期的血清标本
  用于病毒分离培养方法同上。同时要留部分作为双分血清的急性期血清备用。
  (2)感染7天以后的血清标本
  与急性期血清配对同时做HI试验检测,方法见(中疾控发[2003]445号)附件。
  3、常规检测中可疑标本
  在常规流感监测中实验室发现HA阳性而血清H1,H3和B型血清皆不抑制标本,应用 H5试剂盒做鉴定。
  四、检测结果
  1、分离到病毒,HI试验H5抗体 阳性或同时PCR试验H5阳性,可报禽流感H5型阳性,送国家流感中心复核。
  2、分离到病毒,HI试验H5抗体 阴性,PCR试验H5阳性者,原始标本送国家流感中心进一步检测。


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