4.2乙腈：农药残留级。
4.3标准品：标准品醋酸氢化可的松、醋酸氟轻松、醋酸可的松、醋酸地塞米松、醋酸泼尼松、地塞米松均由中国药品生物制品检定所提供，纯度≥99%。
4.4标准溶液：分别准确称取醋酸氢化可的松、醋酸氟轻松、醋酸可的松、醋酸地塞米松、醋酸泼尼松、地塞米松适量，用甲醇（4.1）配制成2.00mg/mL标准贮备溶液。准确量取上述标准贮备溶液适量，用甲醇稀释配制成浓度为20.0µg/mL的混合标准中间溶液，将标准中间溶液转移到安瓿瓶中于4°C保存。临用前，再根据需要以甲醇配制成不同浓度的标准使用溶液。
4.5 0.45μm滤膜。
5 仪器
5.1 液相色谱-串联质谱联用仪：HP1100高效液相色谱仪（Agilent） - API 4000质谱仪（Applied Biosystems） ， 电喷雾离子化源（ESIMS， NI/PI模式）。
5.2 分析天平：感量0.1mg和0.001g。
5.3实验室纯水机：Barnstead纯水机。
5.4涡旋振荡器：Scientific Industries 涡流振荡器。
5.5 具塞试管：10mL。
6 试样的制备与保存
6.1 试样的制备
取有代表性样品5g，搅拌均匀，制成实验室样品。
6.2 试样保存
制备好的试样置于室温保存。
7 测定步骤
7.1样品前处理
称取0.1～0.2g样品 （精确到0.001 g） ，置于10mL试管中，加入3.00mL甲醇溶液，涡旋振摇使样品分散后，超声振荡10min。静置，吸取上清液经滤膜（4.4）过滤后，供液相色谱-串联质谱测定。
7.4 测定
7.4.1液相色谱条件
a）色谱柱：Waters Symmetry
®C
18，5μm， 3.9×150mm；
b）柱温：25℃；
c）流动相：流动相为乙腈和水，等度淋洗。0～18min，乙腈：水＝50：50。
d）流速：200μL /min；
e）进样量：10µL。
7.4.2 质谱条件
a）离子化方式：热喷雾电离（TSI）；
b）扫描方式：正离子扫描；
c）检测方式：多反应监测（MRM）；
d）碰撞气（CAD）：6.0 psi；
e）气帘气（CUR）：20.0 psi；
f）雾化气（GS1）：35.0 psi；
g）加热气（GS2）：30.0 psi；
h）喷雾电压（IS）：5500V；
i）去溶剂温度（TEM）：450°C；
j）碰撞室射出电压（CXP）：16V
k）定性离子对、定量离子对、扫描时间、碰撞气能量和去簇电压，见表3。
表3 糖皮质激素的定性离子对、定量离子对、扫描时间、碰撞气能量和去簇电压
化合物
| 定性离子对
（m/z）
| 定量离子对（m/z）
| 扫描时间
Dwell time（ms）
| 碰撞气能量
CE（eV）
| 去簇电压DP（V）
|
醋酸氢化可的松
| 405.2/309.3
| 405.2/309.3
| 100
| 28.0
| 30.0
|
| 405.2/327.3
|
| 100
| 28.0
| 32.0
|
醋酸氟轻松
| 495.2/337.3
| 495.2/337.3
| 100
| 25.0
| 32.0
|
| 495.2/475.3
|
| 100
| 25.0
| 32.0
|
醋酸可的松
| 403.2/163.2
| 403.2/163.2
| 100
| 32.0
| 38.0
|
| 403.2/343.2
|
| 100
| 30.0
| 38.0
|
醋酸地塞米松
| 435.3/397.2
| 435.3/397.2
| 100
| 16.0
| 38.0
|
| 435.3/415.3
|
| 100
| 16.0
| 45.0
|
醋酸泼尼松
| 401.2/341.2
| 401.2/341.2
| 100
| 18.0
| 35.0
|
| 401.2/383.2
|
| 100
| 18.0
| 35.0
|
地塞米松
| 393.2/355.1
| 393.2/355.1
| 100
| 17.0
| 74.0
|
| 393.2/373.3
|
| 100
| 14.0
| 86.0
|
